NOD樣受體1elisa試劑盒的操作流程如下:
?。?)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
?。?)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,產(chǎn)品僅用于科研用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
?。?)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
?。?)洗板,同(4)。
?。?)每孔加1:稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液。
?。?)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
?。?)洗板,同(4)。
?。?0)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,測得的OD值為兩者之差,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
?。?1)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。
NOD樣受體1elisa試劑盒的使用注意事項:
1、雖然本試劑在有效期過后很長一段時間仍可以使用,但還是強烈建議您在管體規(guī)定的有效期內(nèi)正確使用。
2、請不要在臟亂和強光環(huán)境中取用,以免造成污染和失效。
3、如果一次使用很少可以將其適當分裝后使用,這樣可以防止試劑污染。