血清是ELISA試劑盒實驗前的必要標本之一,所以我們在做實驗前需要對血清有個充分的了解,我們需要知道血清是怎么儲存的,血清是怎么操作的。
1.血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。
2.一般提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。
3.瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。
4.heat-inactivation是指56℃,30分鐘加熱已*解凍之血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement)去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為會造成沈淀物之顯著增多,且會影響血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。
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