一、原理
培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長(zhǎng)良好,所以要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果以每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和方法與血細(xì)胞計(jì)數(shù)相同。
在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞,總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力,由組織中分離細(xì)胞一般也要檢查活力,以了解分離的過(guò)程對(duì)細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力,了解凍存和復(fù)蘇的效果。
用臺(tái)盼蘭染細(xì)胞,死細(xì)胞著色,活細(xì)胞不著色,從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。利用細(xì)胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應(yīng),也可測(cè)定細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力。
二、儀器、用品與試劑
1、儀器與用品:普通顯微鏡、血球計(jì)數(shù)板、試管、吸管、酶標(biāo)儀(或分光光度計(jì))
2、試劑:0.4%臺(tái)盼蘭,0.5%四甲基偶氮唑鹽(MTT)、酸化異丙醇
3、材料:細(xì)胞懸液
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