盡管固定對于組織形態(tài)的保留是*的,但這一過程對IHC/ICC檢測也有不良影響。固定可能會改變蛋白的生化特性,如目的表位被掩蓋,或不再與一抗結合。表位的掩蓋可能是由氨基酸與表位的交聯(lián)、表位附近無關肽段的交聯(lián)、表位構象的改變或抗原靜電荷的改變引起的??乖迯椭傅氖悄孓D表位掩蓋和恢復表位-抗體結合的技術。
抗原修復技術
抗原修復的需要取決于多個變量,包括但不限于,目的抗原、所使用的抗體、組織類型,以及固定方法和持續(xù)時間。多克隆抗體能識別多個表位,因此即使不進行抗原修復,它們也比單克隆抗體更有可能檢測到特定抗原。
目前有多種技術可恢復表位的免疫反應性。簡單的方法有改變抗體稀釋液的pH或陽離子濃度,這可能影響抗體與表位的親和力。對于部分掩蓋的表位,在開始抗原修復之前可以先試試改變一抗的孵育條件。不過,這一步也需要抗體濃度、孵育時間和溫度的進一步優(yōu)化。在討論抗體修復方法時,技術通常分為兩大類,蛋白酶誘導的表位修復(PIER)和熱誘導的表位修復(HIER)。一旦優(yōu)化好,抗原修復的影響可能是明顯的。
蛋白酶誘導的表位修復(PIER)
在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等都曾成功恢復抗體與表位的結合。人們認為作用機制是切割了可能遮蓋表位的肽段。PIER的缺點在于恢復免疫反應性的成功率低,且有可能破壞組織形態(tài)和目的抗原。
100148-199301 對照品 檢查 50mg
100151-199202 吡哌酸 對照品 檢查 50mg
100153-199603 潑尼松龍 對照品 含量測定 50mg
100154-200501 腎上腺素 對照品 HPLC含量測定 100mg
10155-0004 維生素D2 對照品 含量測定 50mg
100156-200003 維生素K1 對照品 含量測定 50mg
100158-200204 西咪替丁 對照品 鑒別 50mg
0160-9602 鹽酸丙咪嗪 對照品 檢查 50mg
100161-200503 鹽酸地爾硫卓 對照品 HPLC法含量測定 100mg
100162-200302 鹽酸氟奮乃靜 對照品 TLC法檢查用 50mg
100163-200405 鹽酸雷尼替丁 對照品 HPLC法含量測定 100mg
100164-200402 鹽酸哌唑嗪 對照品 UV法含量測定 50mg
100165-200103 鹽酸乙胺丁醇 對照品 檢查 50mg
抗原100166-200502 鹽酸異丙腎上腺素 對照品 含量測定 50mg
100167-199202 鹽酸左旋咪唑 對照品 檢查 50mg
0169-9402 重酒石酸去甲腎上腺素 對照品 含量測定 100mg
100170-200303 左旋多巴 對照品 HPLC法含量測定用 50mg
100171-200503 醋酸甲地孕酮 對照品 含量測定 100mg
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