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    探針法qPCR試劑盒的特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

    點(diǎn)擊次數(shù):693  更新時間:2022-12-25
       探針法qPCR試劑盒的特點(diǎn):
      1、定量準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)耗時短
      從探針法qPCR原理可以看出,擴(kuò)增引物和探針序列都匹配后擴(kuò)增的產(chǎn)物才能產(chǎn)生熒光信號,這樣就確保了熒光信號是目的片段的擴(kuò)增產(chǎn)生的,排除了非特異性擴(kuò)增的影響,特別是針對一些低拷貝和低濃度的樣品,檢測結(jié)果所見即所得,從而保證了檢測的準(zhǔn)確性。因探針法qPCR的高特異性,因此無需再設(shè)置熔解曲線檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性如何,有效縮短了實(shí)驗(yàn)時間。
     
      2、特異性高
      在探針法qPCR中,除加入引物外還增加一條特異性探針,當(dāng)引物和探針都與靶基因結(jié)合時,擴(kuò)增時探針才會被水解酶切發(fā)出熒光。當(dāng)引物發(fā)生非特異性擴(kuò)增時,探針不會結(jié)合到非特異性片段上,因此不會被水解酶切而發(fā)出熒光,從而提高了特異性。
     
      3、兼容多重反應(yīng)
      在探針的5'端標(biāo)記不同的熒光修飾,則不同的探針在檢測過程中就會發(fā)出不同的熒光信號。根據(jù)此原理可以將檢測不同目的基因或者基因型的探針標(biāo)記不同的熒光修飾做混合檢測,這樣就可以做多重檢測,檢測對應(yīng)的熒光信號就是檢測對應(yīng)探針的熒光定量結(jié)果。多重檢測大大節(jié)省了檢測的物料試劑成本,也大大節(jié)省了檢測時間,進(jìn)一步提高了檢測的速度和適用性。
     
      探針法qPCR試劑盒的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
      1)PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
     
      2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
     
      3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
     
      4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
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