5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白試劑盒是針對從各種動物細(xì)胞中快速高效地抽提分離不同亞細(xì)胞蛋白質(zhì)組份而設(shè)計的。運用含有不同去污劑的抽提試劑,按照亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)對動物細(xì)胞進行有序的抽提,可將細(xì)胞內(nèi)的蛋白依次分離成四部分,分別是:胞漿蛋白、細(xì)胞膜和細(xì)胞器膜蛋白、核蛋白、細(xì)胞骨架(微絲和中等纖維)蛋白和核基質(zhì)蛋白。可廣泛運用于各種相關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)實驗,如蛋白質(zhì)(酶)的亞細(xì)胞定位、內(nèi)(外)源性因子亞細(xì)胞定位以及在細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)中的作用。
5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白試劑盒對蛋白濃度測定:
蛋白質(zhì)濃度線性檢測范圍為10-2000µg/ml。標(biāo)準(zhǔn)測定時,用1cm光程玻璃或塑料比色皿,反應(yīng)終體積1.1ml,比色計測定。微板測定時,用96孔板,反應(yīng)終體積225µl,用酶標(biāo)儀、微板比色儀測定。
標(biāo)準(zhǔn)測定:將0.05~0.1ml標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本與工作溶液混合。
微板測定:將25µl標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣本與工作溶液混合。
37ºC反應(yīng)30min;也可25ºC室溫2小時或過夜。反應(yīng)可增加檢測靈敏度。
將反應(yīng)管冷卻至室溫。測定562nm光密度(OD)值。
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。X軸為BSA標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度,Y軸為各標(biāo)準(zhǔn)管對應(yīng)的OD562值。用Excel擬合曲線并計算蛋白濃度。